Los agentes tamponantes biológicos son de gran importancia en la investigación bioquímica. Se utilizan ampliamente en inmunotransferencia, biochip e hibridación biológica, diagnóstico in vitro, biomedicina y otras industrias.
El SISTEMA DE bioferente contiene docenas de variedades. Variedades típicas como Tris, HEPES, etc. Este artículo introducirá la variedad más común de las ventajas del tampón Tris y los asuntos de uso que necesitan atención.
Tris trometaminaEs un tipo de sal tampón ampliamente utilizada en el campo biomédico, el nombre completo de triS (hidroximetil) aminometano, fórmula química C4H11NO3, partícula cristalina blanca, CAS No. : 77-81-1, 8,06 de pKa a 25 ° C, a menudo utilizado en tampón de proteínas o ácidos nucleicos, el rango efectivo suele estar entre pH 7,0 y 9,2.
Tris se utiliza para cultivar cristales de proteína en diferentes condiciones de pH. Tris es también uno de los principales componentes del tampón de electroforesis de proteínas. Forma un sistema tampón con glicina en tampón de electroforesis para estabilizar el pH durante la electroforesis. Además, Tris Es un intermedio en la preparación de tensioactivos, promotores de vulcanización y algunos fármacos. Tris también se utiliza como estándar de titulación.
Los tampones Tris comunes son tampón Tris-HCl, tampón TRis-fosfato y una variedad de tampones derivados, como TBS, TE, etc.
1. El álcali de Tris es fuerte, así que usted sólo puede utilizar este sistema de tampón para preparar una amplia gama de tampón de pH de ácido a alcalino, una amplia gama de aplicaciones;
2. El tampón Tris tiene poca interferencia en el proceso bioquímico y no precipita con iones de calcio, magnesio y metales pesados;
3. Tris tiene alta solubilidad en agua y es inerte a muchas enzimas;
4. Alta capacidad de amortiguación de Tris, fuerte capacidad de amortiguación entre pH7.5-9,0;
5. El tampón de Tris es ampliamente utilizado y juega un papel importante en bioquímica, biología molecular, diagnóstico in vitro, cosméticos, recubrimientos y otros campos.
1. El Valor del pH del tampón Tris se ve muy afectado por la temperatura, △pKa / ℃ = -0.031, por ejemplo: 4 ℃ buffer pH = 8,4, 37 ℃ pH = 7,4, por lo que debe prepararse con el uso de la temperatura, la preparación a temperatura ambiente del tampón TRIS-HCl no se puede usar por 0 ℃ ~ 4 ℃.
2. El valor de pH del tampón Tris se ve muy afectado por la concentración de la solución. Cuando el tampón se diluye diez veces, el cambio del valor de pH es mayor que 0,1
3. Tris reacciona con varias moléculas hasta cierto punto, incluidos inhibidores de RNasa, aldehídos, enzimas, ADN y metales comunes como Cr3 , Fe3 , Ni2 , Co2 y Cu2 , etc., que puede desempeñar un papel inhibidor en algunos sistemas. La interacción con otros componentes debe considerarse en el proceso de preparación.
4. El tampón Tris es fácil de absorber CO2 en el aire, y el tampón preparado debe estar bien sellado;
5. El tampón Tris tiene un cierto efecto de interferencia en algunos pH electrodos de, por lo que es necesario utilizar electrodos compatibles con la solución Tris;
6. El tampón Tris no es adecuado para la determinación del ácido diquinolínico (BCA);
7. La inhalación, la ingestión y la absorción cutánea de Tris pueden causar lesiones. Use guantes y gafas al operar;
8. Cuando se usa como tampón de proteínas, si se requiere espectrometría de masas para el trabajo posterior, Tris no es adecuado y es mejor cambiar a otro tampón que pueda ser tolerado por el espectrómetro de masas.
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