Categorías de Sales tampón comunes

En la cromatografía de fase inversa, el pH de la fase móvil está generalmente entre 2-7. Cuando el analito puede disociarse en condiciones de fase inversa, o cuando el pH de la muestra está fuera del rango de 2-7, aTampón de salEs obligatorio. Los compuestos que pueden disociarse en condiciones de fase inversa generalmente tienen grupos amino y carboxilo, con valores de pKa entre 1-11. La ELECCIÓN DEL pH tampón correcto puede garantizar que los grupos funcionales disociados existan en forma iónica o en forma de compuesto neutro. Si el pH de la muestra es perjudicial para la columna, entonces una solución tampón puede hacerla más suave o reducir el daño. El intervalo de tolerancia al pH para una columna convencional a base de sílice es 2-8. Las sales de electrolito tamponadas comunes se clasifican de la siguiente manera.

1. AlcalinaSales tampón

Los aditivos comunes incluyen amoníaco y trietilamina, los cuales pueden aumentar el pH del agua a un nivel muy alto, lo suficientemente alto como para disolver las partículas de gel de sílice. Por lo tanto, deben utilizarse con precaución. Además, estos dos disolventes generalmente no se eliminan fácilmente mediante métodos de lavado y mantenimiento. Especialmente PARA LA trietilamina, incluso si es de pureza cromatográfica, puede estar contaminada debido al deterioro después de un largo período de almacenamiento.

2. ÁcidoSales tampón

1. ácido fórmico: generalmente se usa en una concentración por debajo de 1%, puede aumentar el pH del agua a alrededor de 2.

2. ácido acético: ligeramente menos ácido que el ácido fórmico, generalmente utilizado en una concentración que no exceda el 5%, puede aumentar el pH del agua a alrededor de 2.

3. Ácido trifluoroacético: un ácido relativamente fuerte, generalmente utilizado a una concentración que no exceda el 0.5%, puede disminuir el pH del agua por debajo de 2. Tiene una gran intensidad de iones y un cierto efecto de par de iones, y a menudo se usa como aditivo al analizar proteínas y péptidos. Los problemas más fatales de estos tres ácidos radican en su absorción de rayos UV a bajas longitudes de onda. Por lo general, no se recomienda su uso en longitudes de onda inferiores a 215nm. Además, el ácido fórmico, el ácido acético y el ácido trifluoroacético son volátiles y la concentración de estosSales electrolíticas tamponadasPuede cambiar con el tiempo.

4. Ácido fosfórico: Este es un ácido no volátil con buena intensidad de iones. Lo más importante es que no hay absorción de fondo en el área UV de baja longitud de onda. Sin embargo, también tiene algunas desventajas, como ser incompatible con los métodos de espectrometría de masas. Además, hay algunos otros ácidos, como el ácido sulfúrico, el ácido clorhídrico o el ácido cítrico, pero son raros.

3. SalSales tampón

En comparación con los simples tampones ácido-base, ajustando las proporciones de las dos Sales en diferentesSales tampón, Se puede preparar fácilmente una solución tampón con un cierto pH, y las sales tampón con capacidad de tamponamiento pueden controlar el valor de pH de la fase móvil.

1. Sales de formiato: las sales de formiato de uso común en cromatografía líquida son formiato de amonio. Este tipo de sal tiene buena solubilidad, es completamente compatible con los métodos de espectrometría de masas líquidas y tiene un impacto relativamente pequeño en las columnas cromatográficas. Sin embargo, la desventaja es que la intensidad de los iones es relativamente baja. Además, las sales de formiato son propensas a la delicuescencia, lo que dificulta el peso y es potencialmente volátil en la fase móvil. Cuando se combina con ácido fórmico, el sistema de tampón de formiato de ácido fórmico y amonio puede lograr una capacidad de tamponamiento dentro de un rango de pH de 3 ~ 4,5, simplemente ajustando la proporción de los dos.

2. sales de acetato: ejemplos comunes son el acetato de amonio. El uso de sales de acetato es similar a las sales de formiato, y la intensidad de los iones no es alta. El sistema tampón de ácido acético-acetato de amonio puede controlar el pH en un rango de 4 ~ 5,5.

3. Sales de fosfato: una de las soluciones tampón más comúnmente utilizadas en HPLC bajo condiciones de detección UV porque se puede utilizar en longitudes de onda por debajo de 220 Nm. Las sales de fosfato tienen tres valores de pKa. Aunque se utilizan ampliamente, se debe prestar atención a sus problemas de solubilidad para evitar que precipiten en bombas de HPLC o columnas cromatográficas en condiciones de alta concentración.

Las sales de sodio y potasio del ácido fosfórico se usan comúnmente, y la capacidad de control del pH de los dos es muy similar, con solo una ligera diferencia en la intensidad de los iones. En la mayoría de los casos, se pueden usar indistintamente. Debido a que el ácido fosfórico es un ácido polibásico, puede formar un monohidrógeno fosfato y un Dihidrógeno fosfato, por lo que el uso del sistema de tampón de fosfato para ajustar el pH es más flexible y puede cubrir una amplia gama, y puede proporcionar alta intensidad de iones. Desafortunadamente, el sistema de tampón de fosfato para la fase móvil no es compatibleLe con espectrometría de masas.