Principios de desarrollo para seleccionar sales de tamponado

Muchos métodos de fase líquida usan sales tampón. Se ha descubierto que muchas personas no comprenden la aplicación de sales tampón en los métodos de fase líquida, por lo que me gustaría compartir algunos de mis puntos de vista y estimular la discusión.

1. Tiempo para aplicar sales tampón

Si la muestra o las impurezas clave a estudiar en la muestra tienen tendencias de ionización, otros casos específicos se discutirán por separado. Entre los componentes con fuertes tendencias de ionización, algunos están en estado molecular y se combinan mejor con la fase estacionaria cromatográfica de fase inversa; otros están en estado iónico y tienen una mayor afinidad por la fase móvil. Si el estado de ionización del estado de la molécula y el estado iónico no se controla mediante el uso de sales tampón, es fácil tener cola máxima y bifurcación. En este caso, el agua y los sistemas orgánicos no deben utilizarse como fase móvil, y las sales tampón y los sistemas orgánicos deben seleccionarse.

2. Capacidad de amortiguación y selección de pH de sales tampón

Al usarSales electrolíticas tamponadasEn la fase móvil, debe tener una cierta capacidad de almacenamiento en búfer. Si la reducción de la cantidad de inyección de muestra puede mejorar la forma del pico, puede indicar que la capacidad de amortiguación de la solución de sal tampón es insuficiente. La capacidad de tamponamiento de la solución de sal tampón está relacionada con la concentración de la sal tampón y el valor de pH de la solución de sal tampón. Cuanto mayor sea la concentración de la sal tampón, más fuerte será la capacidad de tamponamiento; cuanto más cerca esté el valor de pH de la solución de sal tampón de su pKa, más fuerte será la capacidad de tamponamiento. Generalmente, el valor de pH de la solución de sal tampón debe estar dentro del rango de pKa ± 1. Con el fin de garantizar que el tiempo de retención de la principal Componente no se desvía mucho debido a cambios leves en el valor de pH, el valor de pH de la solución de sal tampón debe estar fuera del rango de pKa ± de la muestra 2.

3. Longitud de onda de corte de sales tampón

Cada sal tampón tiene una longitud de onda de corte correspondiente, y la longitud de onda de detección del método no debe ser menor que la longitud de onda de corte de la solución de sal tampón. Cuanto más cerca esté la longitud de onda de detección de la longitud de onda de corte de la fase móvil, mayor será el ruido de línea de base, mayor será el error del valor de respuesta y menor será el valor de respuesta del componente y la sensibilidad.

4. ideas generales para la aplicación de sales tampón

1. La concentración de sal tampón es generalmente 10-50 mmol/L. La concentración de la sal tampón debe seleccionarse de acuerdo con las propiedades de la muestra y la cantidad de inyección para satisfacer la capacidad de tamponamiento requerida.

2. La proporción máxima permitida de la fase orgánica en la elución en gradiente debe determinarse mezclando experimentos de sales tampón y fases orgánicas. Se deben tomar diferentes proporciones de sal tampón-fase orgánica para determinar la proporción máxima permitida de la fase orgánica, como 10:90, 20:80, 30:70, etc. Las sales tampón no deben fijarse en una proporción alta en el instrumento para evitar que la precipitación de las sales tampón dañe el instrumento.

3. Elija sales tampón de acuerdo con múltiples restricciones, como longitud de onda de corte, valor de pH y capacidad de amortiguación, etc. Por ejemplo, si la longitud de onda de detección está en la absorción final, generalmente se debe seleccionar fosfato.

4. Las soluciones de sal comúnmente tampón incluyen: ácido fosfórico 0.1%/ácido trifluoroacético/Solución de ácido acético/ácido fórmico, 0,02-0. Solución de dihidrógeno fosfato de potasio de 05mol/L (ajustada a pH 3,0 con ácido fosfórico), etc.

5. Para compuestos alcalinos, se prefieren las sales de potasio, que pueden suprimir mejor el efecto de cola.