Moderna: Uso del sistema de amortiguación TRIS para mejorar la estabilidad del ARNm

Recientemente, Moderna celebró el Quinto Día DE LA Ciencia y La Tecnología. En el informe, la compañía presentó avances recientes en la administración y estabilidad de la terapia de ARNm modificada.

El ARNm en sí es inestable, por lo que mejorar la estabilidad del ARNm es de gran importancia práctica para prolongar la duración del almacenamiento y la vida útil.

Los investigadores de Moderna han encontrado en sus estudios que el nitrógeno de la amina terciaria de los lípidos ionizables en las formulaciones de LNP puede reaccionar con el ARNm para generar aductos.

Estos aductos pueden causar ARNm no traducido, reduciendo así la expresión de la proteína codificada por el ARNm.

Dado que los lípidos ionizables están ampliamente presentes en las formulaciones de LNP, el mecanismo de disminución de la expresión de ARNm se puede aplicar ampliamente a la mayoría de los productos de LNP utilizados en la industria.

Según los estudios de Moderna, se deben tomar diferentes medios para reducir la generación de aductos durante la fabricación de productos LNP basados en ARNm, que pueden traer múltiples beneficios, incluida la mejora de la vida útil. permitiendo el almacenamiento a alta temperatura, manteniendo la actividad del producto y asegurando la consistencia entre lotes.

Moderna afirma que el tampón Tris puede reducir la formación de aductos, permitiendo el almacenamiento a largo plazo de los productos de ARNm a 2-8 ° C.

Los mecanismos de reacción asociados se resumen de la siguiente manera:

① Se sabe que las bases de ácidos nucleicos reaccionan con los aldehídos.

② En la fracción LNP, el nitrógeno de la amina terciaria de los lípidos ionizables se oxida para formar una gran cantidad de N-óxidos.

③ En el tampón ácido, los N-óxidos se degradan para generar aminas y aldehídos secundarios.

④ Los aldehído reaccionan con las bases de las moléculas de ARNm (ver ① para el mecanismo de reacción), afectando la estabilidad de las moléculas de ARNm y los niveles de traducción de proteínas.

⑤ TRIS, como eliminador de aldehído, puede reaccionar con los aldehídos generados y disminuir la reacción entre las bases de ARNm y los aldehídos.

Vale la pena mencionar que TRIS ha sido ampliamente utilizado como un eliminador de formaldehído y no se limita al campo biomédico. Por ejemplo, se ha informado queTampón Tris de trometaminaSe ha utilizado como un nuevo removedor de aldehído en mortero de cemento o pintura de látex, con el siguiente mecanismo de reacción para la eliminación de formaldehído:

TRIS reacciona con formaldehído en una relación de masa 1:2. La reacción es reversible, y el producto final es oxazolidina.

Debido a la importancia de los lípidos ionizables en la estructura y función de LNP, es difícil reemplazarlosEn poco tiempo. Por lo tanto, para mejorar la estabilidad de las moléculas de ARNm, reducir los requisitos de almacenamiento de las vacunas ARNm-LNP y prolongar la vida útil, vale la pena intentar seleccionar el tampón TRIS para desempeñar el papel de regulador de pH y eliminador de aldehído.

AVT LtdRecientemente lanzado un producto TRIS (número de registro CDE: F20220000153, registro DMF en proceso) con las ventajas de la producción en condiciones de GMP, grado de inyección, bajo contenido de endotoxinas, suministro estable basado en la localización, forma rentable, sin ADNasa/RNasa, etc. Además, AVT ofrece tampón TRIS-HCL de grado reactivo. No dude en preguntar.