Rango de pH y método de preparación del tampón Tris

Ⅰ. rango de pH del tampón Tris

El tampón Tris es uno de los agentes tamponantes más utilizados en la investigación bioquímica, y su rango de pH efectivo común está en el rango "neutro", como:

Tampón Tris: pH = 7,5 ~ 9

Tampón Tris-HCl: pH = 7,5 ~ 8,5

Tampón tris-fosfato: pH = 5,0 ~ 9,0

Una y otra vez. El método de preparación del tampón Tris

1. Preparación de 0.05mol/L tampón Tris para un valor de pH específico: Mezcla 50ml de 0.1mol/l Tris solución base con el volumen correspondiente (Unidad: ml) de 0,1 mL de HCl como se muestra en la tabla a continuación, y añadir agua para ajustar el volumen a 100ml.

2. dos métodos de configuración de Tris-HCl tampón

El primer método es preparar soluciones de Tris 0,05 mol/L y HCl 0,05 mol/L, respectivamente, y luego mezclarlas de acuerdo con el volumen enumerado en la tabla común.

Sin embargo, como la concentración estándar de ácido clorhídrico diluido no es fácil de preparar, se usa comúnmente otro método: tomar la configuración de 1 l de tampón Tris-HCl 0,1 mol/l como ejemplo: En primer lugar, se disolvieron 12,11g de base Tris en 950 ml ~ 970 ml de agua desionizada, Y se añadió HCl 4 N por gota mientras se agitaba. El Valor de pH de la solución se midió por medidor de pH hasta el valor de pH deseado, y a continuación se añadió agua hasta obtener 1 l.

3. Otros búferes derivados de TRIS

Además de Tris-HCl, hay una variedad de tampones derivados de TRIS:

TBS = Tris-HCl NaCl KCl, que se usa a menudo para limpiar tejidos inmunoteados o membranas de transferencia Western en Western Blotting.

TBST = Tris-HCl NaCl tween20, un tipo de tampón de lavado de membrana comúnmente utilizado en Western Blotting;

TE = Tris-HCl EDTA, que protege las bases del ADN y se utiliza a menudo para la estabilización y el almacenamiento del ADN;

Ácido acético TAE = Tris base EDTA es un sistema tampón ampliamente utilizado para electroforesis a corto plazo de grandes fragmentos de ADN.

TBE = Trisbase ácido bórico EDTA, adecuado para la electroforesis de ADN a largo plazo, el efecto de separación de fragmentos pequeños es mejor.

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